蛋白分子量測定

分子量是有機化合物基本的理化性質(zhì)參數(shù)。分子量正確與否往往代表著所測定的有機化合物及生物大分子的結(jié)構(gòu)正確與否。分子量也是多肽、蛋白質(zhì)等鑒定中首要的參數(shù)，也是基因工程產(chǎn)品報批的重要數(shù)據(jù)之一。
基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(maldi-tof-ms)是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜，具有樣品消耗量少、靈敏度高、測定速度快、易于實現(xiàn)高通量、可對蛋白進行大規(guī)模的鑒定及生物大分子的分子量測定等特點，為蛋白質(zhì)研究提供了一種強有力的分析測試手段。簡便，直觀，可直接對大分子混合物進行測定，并且基本不產(chǎn)生碎片峰是maldi-tof-ms的優(yōu)勢，因此這項技術(shù)在生物大分子分子量測定中得到廣泛應(yīng)用。maldi-tof-ms儀器主要由兩部分組成：基質(zhì)附助激光解吸電離離子源（maldi）和飛行時間質(zhì)量分析器（tof）。maldi的原理是用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而使生物分子電離的過程。它是一種軟電離技術(shù)，適用于混合物及生物大分子的測定。tof的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據(jù)到達檢測器的飛行時間不同而被檢測即測定離子的質(zhì)荷比（m/z）與離子的飛行時間成正比，從而實現(xiàn)對離子的檢測。maldi-tof的準(zhǔn)確度高達0.1%-0.01%，遠遠高于目前常規(guī)應(yīng)用的sds電泳與高效凝膠色譜技術(shù)，目前可測定生物大分子的分子量范圍為700-600000da。
百泰派克公司采用bruker公司的ultraflextreme™ maldi tof/tof質(zhì)譜系統(tǒng)，為廣大科研工作者提供生物分子分子量測定服務(wù)，用于分析目標(biāo)蛋白或多肽的分子量，檢測蛋白二聚體，以及對樣品純度進行大體評估。
樣品要求
1. 樣品的需要量約為10-50ug；
2. 樣品純度>90%；
3. 樣品準(zhǔn)備過程中盡量避免表面活性劑，例如sds、triton-x等的使用；鹽濃度，例如tris等也盡量降低；
4. 如果您在準(zhǔn)備樣品的過程中必須要用到表面活性劑以及較高的鹽濃度，我們收到您的樣品后會首先通過相關(guān)實驗對上述化合物進行去除，然后進行后續(xù)的分子量測定。
注意
膠粒樣品或者轉(zhuǎn)移到pvdf膜上的樣品不適合于分子量測定實驗。
研究案例
在 maldi-tof 的應(yīng)用過程中，除了可以檢測樣品的分子量，還能提供樣品本身純度的信息。如下圖所示，樣品在理論分子量 1046.6da范圍出現(xiàn)明顯的信號峰，且樣品純度較好。
分子量測定研究案例
分子量測定研究案例
中/英文項目報告
在技術(shù)報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術(shù)報告，報告包括：
1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文）
3. 質(zhì)譜圖片
4. 原始數(shù)據(jù)
5. 蛋白質(zhì)分子量和純度分析結(jié)果